生物(wù)細胞(bāo)樣本的(dí)儲存不僅是為了儲存細胞(bāo),更(gēng)是為(wéi)了(liǎo)提(tí)高細胞(bāo)的存活時(shí)間,從而(ér)達(dá)到這(zhè)種效果。因此,必(bì)須使(shǐ)用液(yè)氮罐對細胞進(jìn)行持續的(dí)溫度控製,以(yǐ)確保細(xì)胞(bāo)的(dí)活性(xìng)。然而,冷凍(dòng)細(xì)胞的(dí)不(bù)當操作(zuò)也(yě)會(huì)影響(xiǎng)細胞(bāo)的活(huó)力(lì)。我們(mén)可以這(zhè)樣(yàng)做,以(yǐ)確(què)保取出細胞時(shí)不會失去(qù)活性或減(jiǎn)少(shǎo)活性。
使用(yòng)液氮(dàn)罐怎麼操(cāo)作能(néng)減少細(xì)胞損失
冷(lěng)凍細胞過程的關鍵是(shì)與(yǔ)體(tǐ)細(xì)胞醒(xǐng)來(lái)時(shí)的(dí)活(huó)力(lì)有(yǒu)關。如果(guǒ)有(yǒu)一(yī)個程(chéng)序化(huà)的溫(wēn)度控製器在-80攝(shè)氏度的冰箱(xiāng)中過(guò)夜(yè)或在液氮容(róng)器中儲(chǔ)存4℃2小(xiǎo)時。事實上(shàng),一般來說,正常體細胞可以在(zài)-80℃下儲存6個月(yuè),如(rú)果儲(chǔ)存在液氮中(zhōng),可以儲(chǔ)存更長(cháng)的時(shí)間。
首先準(zhǔn)備(bèi)冷凍儲存(cún)液,借用(yòng)胰酶消(xiāo)化細(xì)胞(bāo),小心(xīn)用槍(qiāng)將培(péi)養液移入瓶(píng)中(zhōng),或將(jiāng)培養(yǎng)液移(yí)入盤(pán)中,用(yòng)pbs清洗(xǐ)兩次,然後使(shǐ)用(yòng)胰酶消化細(xì)胞,盡(jìn)可能(néng)柔軟。
再次(cì)使用(yòng)細(xì)胞(bāo)培(péi)養液漂浮(fú)細胞,將預(yù)冷(lěng)凍儲存(cún)液(yè)放入消化徹(chè)底的(dí)細胞中,用(yòng)滴管(guǎn)輕輕混合(hé)均(jūn)匀。在每個(gè)冷藏儲存管(guǎn)中(zhōng)加(jiā)入1毫升(shēng)細胞液(yè),並(bìng)標記關閉(bì)後冷凍儲(chǔ)存的細胞名稱(chēng)和儲(chǔ)存時間。
更(gēng)多(duō)內(nèi)容關注金(jīn)鳳(fèng)液氮罐
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