該(gāi)實驗(yàn)在愛(ài)達(dá)荷大學動(dòng)物
，獸醫和食(shí)品科(kē)學係(xì)的生殖(zhí)生理學實驗(yàn)室進(jìn)行。實驗期(qī)間實驗(yàn)室的(dí)溫(wēn)度(dù)約(yuē)為22°C。

　　使用(yòng)容量為30L的(dí)液氮儲罐(Union Carbide Linde，LR-30型，美國(guó))。在實驗(yàn)期(qī)間(jiān)，該罐中(zhōng)沒有儲存精(jīng)液。罐(guàn)頸(jǐng)直(zhí)徑為(wéi)7cm，頸(jǐng)管長度(dù)為12cm，與(yǔ)牧民(mín)授精員和專(zhuān)業人工(gōng)智(zhì)能技術人(rén)員目前(qián)在奶牛(niú)場(cháng)使用的(dí)罐(guàn)相似(sì)。在(zài)實驗開始時，向罐中填充(chōng)18L液(yè)氮(dàn)(相(xiāng)當於22cm)。使(shǐ)用配備有能夠進行6秒(miǎo)響應時間(jiān)的空氣(qì)(氣(qì)體)探頭(tóu)的手(shǒu)持(chí)式熱(rè)電偶溫度計(jì)(TM602;Palmer Wahl Instrumentation Group，Asheville，NC，USA)在(zài)三(sān)個位(wèi)置(zhì)采(cǎi)集溫度測量值(zhí)：1)頸(jǐng)部(bù)部下方2 cm(霜(shuāng)綫上方)，2)頸部部以(yǐ)下(xià)7 cm(霜綫上和建(jiàn)議的(dí)精(jīng)液(yè)吸管移除(chú)位置(zhì)下方)，3)液(yè)氮液位(wèi)上(shàng)方2 cm(圖(tú)1)。

　　通(tōng)過用(yòng)不鏽(xiù)鋼(gāng)勺(sháo)手動(dòng)去(qù)除液氮，罐中的液氮液(yè)位從(cóng)22厘(lí)米逐漸降低到7厘(lí)米(mǐ)(液(yè)氮(dàn)的體積(jī)分別從18升(shēng)逐漸(jiàn)降(jiàng)低到6升(shēng))。如前(qián)所(suǒ)述，在(zài)每個(gè)位置測(cè)量溫(wēn)度(dù)四(sì)次，罐(guàn)中有(yǒu)22
，20
，19
，18
，16
，12
，10和7cm的液氮。每(měi)次(cì)溫度測量之(zhī)間的(dí)間(jiān)隔(gé)時間至(zhì)少(shǎo)為2小時，以便(biàn)有足夠的衝洗期(qī)，避(bì)免潛在的遺留(liú)影(yǐng)響。輪實驗完成後，再次(cì)向同一(yī)罐中注(zhù)入液氮(dàn)，並(bìng)在相同(tóng)的液氮(dàn)水平(píng)和重(zhòng)復次數下(xià)重復(fù)第二(èr)次實(shí)驗(yàn)。

　　使用SAS中的(dí)通用綫性(xìng)混(hùn)合(hé)模型程(chéng)序(xù)GLIMMIX分析(xī)了(liǎo)液(yè)氮(dàn)液位
，位(wèi)置和(hé)雙向相互(hù)作(zuò)用(yòng)對(duì)儲罐(guàn)溫(wēn)度的(dí)影(yǐng)響數據(jù)[8]。該模型(xíng)包(bāo)括(kuò)位(wèi)置
，體積和(hé)按位置(zhì)劃(huá)分的體積(jī)的影(yǐng)響。計算(suàn)了(liǎo)所(suǒ)有儲罐位置的溫(wēn)度(dù)變化(huà)和(hé)小(xiǎo)二(èr)乘平均溫度的參(cān)數(shù)估計(jì)值。顯(xiǎn)著性在P<0.05時較好。

精液儲罐中的(dí)溫度對於維(wéi)持儲罐(guàn)內儲存的(dí)精液(yè)的存活率至(zhì)關(guān)重(zhòng)要(yào)。測量(liáng)溫(wēn)度(dù)的三個位置的溫度(dù)變化(huà)不一(yī)致。根據(jù)估(gū)計(jì)的(dí)方差，位置2(頸(jǐng)部部以下(xià)7厘米，霜(shuāng)綫以下)表現出(chū)大(dà)的變異性(表(biǎo)1)。位(wèi)置(zhì)和(hé)位(wèi)置體積對儲罐(guàn)溫度有(yǒu)影響(xiǎng)(P<0.01)。

　　與頸(jǐng)部(bù)部(bù)以(yǐ)下(xià)7cm(霜綫以下)相(xiāng)比(bǐ)，頸(jǐng)部部以下2cm的(dí)平(píng)均水箱(xiāng)溫度(dù)更高(gāo)(P<0.01)(6.4±0.1°C vs-38.3±0.4°C)(表(biǎo)1)。我們關於位(wèi)置2溫度(霜綫(xiàn)以(yǐ)下)的數據(jù)非常(cháng)接(jiē)近(jìn)Kaproth報告(gào)的上限(-40°C)[4]。隨(suí)著(zhuó)氮水平(píng)的(dí)降低(dī)，溫度(dù)保(bǎo)持在0°C以上，在(zài)頸(jǐng)部(bù)部(bù)以(yǐ)下2厘米處(chǔ)(位置(zhì)1)沒有(yǒu)變(biàn)化。相(xiāng)比(bǐ)之下(xià)，在位(wèi)置2，隨(suí)著液(yè)氮(dàn)體(tǐ)積(jī)的(dí)減少，頸(jǐng)部(bù)部(bù)以(yǐ)下7厘米(mǐ)處的溫(wēn)度(dù)升高(從-41.1±1°C升(shēng)高到(dào)-36.7±1°C;P<0.05)(圖(tú)2)。這(zhè)些(xiē)結果(guǒ)與(yǔ)之(zhī)前的報(bào)告(gào)[4]一(yī)致，即(jí)頸(jǐng)部(bù)區(qū)域溫(wēn)度(dù)升高與儲罐(guàn)液氮液位(wèi)較(jiào)低有關(guān)。盡管(guǎn)位置(zhì)3(液(yè)氮水平以上(shàng)2厘米(mǐ))的平均溫度(dù)為(wéi)-186.3±0.1(表1)，但隨著液氮體(tǐ)積的(dí)減少(shǎo)，溫度升高(從(cóng)-187±0.3°C升(shēng)高到(dào)-185±0.3°C;P<0.05)。